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细胞培养中的污染监控与检测真菌

文章中,我们说到如果在养细胞的过程中,如何判断细胞是否被细菌感染以及如何祛除细菌污染。

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细胞培养中的污染监控与检测——细菌

今天我们来讨论一下,细胞培养过程中的真菌感染。

二、真菌污染

真菌概述

真菌是一类具真核和细胞壁的异养生物。真菌可以通过孢子延续种群,典型的营养体为丝状分支结构。可污染细胞培养基的真菌种类繁多,最常见的有曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。

真菌污染症状

与其他污染相比,真菌污染更容易被观察到。具体表现为:

在培养基中会形成淡黄色或白色的漂浮物,肉眼可见,较易被发现

短期内培养液多不变混浊

显微镜下可以看见细胞之间或是培养基中,有纵横交错穿行的丝状,树枝状或管状菌丝

多数菌丝在高倍镜下可以观察到链状排列的菌株,而念珠菌及酵母菌菌株呈卵圆形,散落在细胞上及细胞周边生长。

真菌污染的鉴定

将待检测的细胞培养基,接种在真菌专用培养基上进行鉴定,例如:马丁培养基、沙氏培养基等。

真菌污染的处理方法

首先应尽快把污染细胞与其它细胞系隔离开,不要打开培养皿,以免孢子飞出;

同时需要对实验过程中所用的器材、试剂和操作空间做相应处理:消毒液喷洒、紫外线消毒、高温灭菌等;

高浓度的抗生素或是抗菌素(两性霉素B、泰乐菌素等)对细胞会产生一定毒性,在使用前可以进行剂量反应实验确定影响;

跟细菌污染的处理方法类似,通常情况下,霉菌污染的细胞,如果不是特别珍贵,建议直接丢弃。

今天的文章到这里就结束啦,下期我们接着聊聊细胞培养中的支原体污染问题,点点


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