文章导读：
通过试验探索了碱解法和板框压滤法处理阿卡波糖菌渣的工艺条件。结果表明：控制菌渣含固质量分数为20%、NaOH加入量为干基菌渣质量的6%、处理时间为6h，可将菌渣中的阿卡波糖质量分数降至30mg/kg以下，活菌可以完全被杀灭；板框压滤机操作压力在1.0MPa，菌渣含水质量分数可降至约60%；通过板框压滤前的水洗，可有效去除菌渣中的盐分。
经处理后的菌渣可作为生产有机肥的原料，不仅实现了菌渣的资源化利用，而且可以降低菌渣的处理成本，避免环境污染。
阿卡波糖是通过游动放线菌的发酵进行生产的，在发酵过程中会产生大量的菌体废渣，主要含有蛋白质、残留培养基、代谢产物、菌丝体、部分残留阿卡波糖以及提取过程中加入的助滤剂、絮凝剂等；若残留培养基、残留药物以及活菌体进入环境中，日积月累会给环境带来潜在的危害。现阶段主要通过高温焚烧对发酵菌渣进行处理，但处理装置的投资和运行费用过高，而且极易对环境造成二次污染。
随着国家仿制药一致性评价及带量采购的逐步落实，降低阿卡波糖生产成本是企业发展的必由之路，因此发展低廉、环保的菌渣处理工艺刻不容缓，探讨菌渣细菌灭活、减量化处理显得尤为重要。
阿卡波糖菌渣中含有较丰富的有机质、粗脂肪、粗蛋白、无机盐、氨基酸和微量元素，将菌渣制成有机肥料或土壤调理剂等资源化产品，是生物医药菌渣经无害化处理后进行资源化综合利用的有效途径之一。
1试验材料与方法
1.1阿卡波糖菌渣液的配制
试验原料取自阿卡波糖生产车间，为板框压滤后的菌渣，含水质量分数约60%。将阿卡波糖菌渣与一定量的清水混合并搅拌均匀，配制成不同固含量的菌渣液进行细菌灭活及减量化试验。
1.2细菌灭活
阿卡波糖的稳定pH为5.5～6.8，极端pH会造成阿卡波糖的降解。试验采用碱解法对菌渣进行灭活，考虑到生产成本及加碱造成后期盐分洗脱的困难，必须控制适宜的加碱量。为此，控制NaOH的加入比例（干基菌渣的质量分数，下同）分别为2%、4%、6%、8%，通过测定菌渣浆液的黏度、处理后菌渣中的阿卡波糖残留效价及活菌数等工艺指标，探究不同加碱比例对菌渣无害化的影响。
1.3板框压滤
板框压滤是固液分离的常用方法。以碱解法处理后的菌渣滤液为试验原料，利用板框压滤机对其进行减量化研究。试验设置0.5、1.0、1.5、2.0MPa4个不同的操作压力，探究不同操作压力对菌渣减量化的影响。
1.4检测指标
菌渣含水率采用称重法测定；pH采用pH计测定；阿卡波糖活菌数采用平皿培养法测定，即1g滤渣加无菌水5mL，于r/min条件下离心分离5min，取上清液1mL涂平皿；钠离子采用微钠离子监测仪测定；黏度采用旋转黏度计测定。
高效液相色谱-串联质谱法测定阿卡波糖含量：采用TSQQuantumUltra高效液相色谱-质谱联用仪和CNWAthenaC18色谱柱（mm×2.1mm）；流动相为乙酸铵溶液-乙腈，梯度洗脱；流速μL/min，柱温25℃，紫外检测波长nm，进样量10μL；质谱条件采用正离子扫描，选择反应监测（SRM）模式进行特征母离子信号的采集，采用标准加入法进行定量。
处理后菌渣中阿卡波糖含量的测定方法：取适量压滤后的菌渣，通过称重法测定其含水质量分数；以60℃的去离子水作为提取剂，超声提取min，重复提取2次；将2次提取液合并进行浓缩，浓缩时加入乙腈有效沉淀蛋白质；采用TSQQuantumUltra高效液相色谱-质谱联用仪测定浓缩液中的阿卡波糖含量，则处理后的干菌渣中阿卡波糖的含量按式（1）计算：
处理后菌渣中盐含量采用电导率测试法测定，即：取10g处理后的湿菌渣，加10mL去离子水，搅拌均匀后于r/min的条件下离心分离5min，取上清液测电导率。
2结果与分析
2.1菌渣含固质量分数对反应体系初始黏度的影响
菌渣含固质量分数反映了体系对菌渣的处理量，而黏度是反映体系流动性的重要指标。菌渣含固质量分数大，反应体系初始黏度较高，体系流动性差，不利于体系的均匀反应；菌渣含固质量分数小，将导致菌渣处理量降低，不仅增大了处理成本，而且引入的大量水分对后续抽滤、回用、干燥等均产生不利的影响。因此，选择合适的菌渣含固质量分数非常重要。
如表1和图1所示：反应体系初始黏度随菌渣含固质量分数的增大呈指数增长趋势；当菌渣含固质量分数达到22%～25%时，由于反应体系初始黏度太大，旋转黏度仪无法进行测定。根据试验结果，菌渣含固质量分数控制在15%～20%范围内较好，最终确定菌渣含固质量分数为20%。
2.2细菌灭活工艺
在细菌灭活工艺的研究过程中，考察了不同NaOH加入比例和停留时间对阿卡波糖残留值和活菌数的影响。由表2可知：随着NaOH停留时间的延长，阿卡波糖残留量及活菌数降低，最佳停留时间为6h；在NaOH加入比例为6%时，阿卡波糖残留值和活菌数即可达到很小的数值，其中阿卡波糖残留值可降至30mg/kg以下，继续增大NaOH加入比例对目标的控制作用并不明显，反而会增加后期盐分洗脱的难度，故最佳的NaOH加入比例为6%。NaOH加入比例及停留时间对体系黏度的影响不大，随着加碱量的增加和停留时间的延长，体系黏度整体呈现较为稳定的状态，均处于有利于过滤的范围内，不会影响过滤效率。
2.3板框压滤机操作压力对菌渣减量化的影响
上述经无害化处理后的混合料浆由板框进料泵送入板框压滤机进行固液分离，板框压滤机操作压力设置0.5、1.0、1.5、2.0MPa4个梯度，用饮用水顶洗菌渣以清除其中的盐分，通过测定压滤后菌渣的含水质量分数和电导率来考察不同操作压力和不同顶洗水量对菌渣减量化及含盐量的影响。由表3可知：随着板框压滤机操作压力的提高，菌渣的含水质量分数逐渐降低；当板框压滤机的操作压力达到1.0MPa以上时，菌渣含水质量分数的降幅减小。考虑到能源的综合利用和能耗成本，板框压滤机操作压力控制在1.0MPa即可达到较好的分离效果。由表4可知：水洗可以有效清除菌渣中的盐分，随着顶洗水量的增加，电导率逐步降低，即所含的盐分逐渐减少；当顶洗水量为3～4BV（菌渣体积倍数）时，电导率的变化较小，即菌渣中的盐分达到了较为稳定的状态。因此，控制顶洗水量3～4BV较为适宜。
3结语
（1）采用碱解法，向含固质量分数为20%的菌渣中加入NaOH，可有效分解菌渣中残留的阿卡波糖。当菌渣中NaOH加入比例为6%、停留时间为6h时，菌渣中阿卡波糖质量分数可降至30mg/kg以下，活菌可以完全被杀灭。
（2）采用板框压滤可以有效降低菌渣中的水分含量，当板框压滤机操作压力为1.0MPa时，菌渣含水质量分数可降至约60%，菌渣减量化效果明显。
（3）菌渣中的盐分可以在板框压滤前水洗去除，当顶洗水量为3～4BV时，菌渣中盐分的洗脱效率较高。
通过灭活处理，有效降低了阿卡波糖菌渣中的活菌数，同时去除了其中残留的阿卡波糖。通过压滤、水洗，洗脱了菌渣中的盐分并降低了其水分含量，使菌渣具备了资源化利用的条件。在上述条件下得到的菌渣清除了可能对作物生长产生不利影响的物质，但保留了菌渣中的营养物质，如有机质、蛋白质以及氮、磷、钾等营养元素，可进一步制成有机肥料。
END
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