临床标本的采集与处理
l保质：
l根据临床特点和病变特征采集适宜的标本
l保量：
l毛发、皮屑尽可能多留；血液、脑脊液、骨髓至少5ml；体腔液至少20ml
l保鲜：
l痰、脓、血、脑脊液、体腔液等应无菌采集后立即送检，2h内处理完毕。
l皮肤标本
l皮屑：病损皮屑或脓液涂片镜检，分离培养
l甲屑：病甲或甲屑用10%KOH微加热溶解角质后镜检，磨碎后分离培养
l毛发：病发（5~6根）或结节、鞘状物10%KOH微加热溶解角质后镜检，直接接种培养
l注：标本采集后需置于无菌平皿内送检，如需存放，不宜置于冷（4℃）或潮湿密闭环境
l眼部标本
l角膜溃疡：样本量较少，液体增菌后再分离培养
l脓液：涂片镜检，分离培养
l呼吸道分泌物
l痰液：取清晨深部痰液，需先刷牙、无菌生理盐水漱口后深咳置于无菌平皿内（10~15ml），立即送检或置于4℃存放。先涂片镜检，如痰液过稠用无菌生理盐水稀释后再分离培养。
l气管吸出液、支气管盥洗液：离心后沉渣分离培养
l血液标本
l至少10ml，先进行增菌后再离心取沉渣镜检、分离培养
l脑脊液、骨髓标本
l脑脊液：至少2ml，必需立即送检无需冷藏。离心后沉渣镜检，或经0.45mm滤膜过滤，将留有真菌的滤膜接种于培养基上
l骨髓：需在无菌试管内加肝素，立即送检，涂片时可取注射器内的颗粒状骨髓
l尿液标本
l取导尿管中段尿20~30ml，立即送检，4℃存放不超过12~15h
l粪便标本
l采集带有少许粘液或脓血的粪便，置于无菌容器中立即送检
l阴道分泌物
l取乳酪样或豆渣样凝块，立即送检或冷藏不过夜
l脓液标本
l无菌取脓液或窦道部位标本，除常规培养外，还可用脑心浸液琼脂作厌氧培养
l体腔液标本
l取腹腔液、胸腔液（20ml）或关节腔液（5ml）离心后沉渣涂片镜检，分离培养。4℃存放不超过12h
l组织标本
l用无菌剪子剪碎后置于盛生理盐水的无菌容器内，4℃存放不超过8h
临床标本的检测
l直接涂片染色镜检
l如有菌丝、孢子或菌体则为阳性，提示有真菌存在，可初步判断为真菌感染。
l分离培养（SDA、PDA）
l点植法：皮屑、毛发、甲屑、痂皮、组织
l划线法：痰、分泌物、脓液、组织液、组织匀浆
l形态学观察
l酵母菌
l菌落：酵母型或类酵母型（假菌丝）
l革兰染色：G+，椭圆形或卵圆杆状，可见芽生孢子
l丝状真菌
l菌落：生长速度，菌落大小，絮状、粉状、颗粒状、毡状等，疏松或致密，褶皱状、放射沟状、同心圆状等，孢子颜色，产色素情况，渗出物，气味等
l小琼脂块培养，乳酸酚棉兰染色：菌丝有无隔膜，孢子梗，分生孢子形状、排列方式
l病理学检查
l炎性反应、肉芽肿，菌丝、孢子或菌体
Candida
C.albicans革兰染色（×）
SDA培养基上菌落特征
类酵母型菌落
乳白色，光滑湿润
有酵母气味
G+，卵圆形
芽生孢子
l翠绿色、光滑型-C.albicans
l芽生孢子椭圆形
l深紫色、光滑型-C.glabrata
l芽生孢子卵圆形呈链
l铁蓝色、光滑型-C.tropicalis
l芽生孢子轮生或呈短链
l粉红色、边缘有毛刺、菌落较大-C.krusei
l芽生孢子圆柱形，假菌丝茂盛
l白色、光滑型-Candidasp.
l芽生孢子椭圆杆状
Candida在科玛嘉显
色培养基上的菌落特征
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