本章要点：1.放线菌的分类2.放线菌的生物学特性3.放线菌的微生物检验 放线菌是一群呈分枝状生长的革兰阳性杆菌。 按对氧的需要可分为需氧性放线菌、兼性厌氧放线菌和厌氧性放线菌。 对人致病的放线菌可按是否含有分枝菌酸分为两大类，一类不含分枝菌酸，如放线菌属；另一类含有放线菌酸，如诺卡菌属。
一、放线菌属 放线菌属的细菌是革兰阳性无芽胞厌氧杆菌，多为动物体表面，特别是口腔正常菌群的成员，少数可引起内源性感染。其中，衣氏放线菌是人类放线菌病最常见的菌种，牛放线菌主要引起牛放线菌病。 （一）生物学特性1.形态与染色 革兰阳性，无芽胞、荚膜和鞭毛。无抗酸性。菌体常形成分枝状无隔菌丝。在患者病灶和脓汁中可找到肉眼可见的黄色小颗粒，称为“硫磺颗粒”，是放线菌在病灶组织中形成的菌落。2.培养特性 本菌培养比较困难，厌氧或微需氧。在有氧环境中一般不生长，初次分离加5%CO2可促进生长。生长缓慢，在培养基上需3～4d才能形成肉眼可见的，灰白色、表面粗糙而不规则的菌落。经人工多次移种后，可形成光滑型菌落。
（二）致病性 衣氏放线是口腔和生殖道常见的正常菌群，只在机体抵抗力减弱或受伤时引起软组织的化脓性炎症。常出现多发瘘管，排出的脓性物质中含有硫磺颗粒，此即为放线菌病。 （三）微生物检验1.标本采集 主要采集脓液和痰液或活检组织。首先检查标本中有无“硫磺颗粒”，可用灭菌注射器抽取未破脓肿的脓汁作检查。2.直接镜检 将“硫磺颗粒”置玻片上，以盖玻片轻压后镜检。在低倍镜下如见有典型的放射状排列的棒状或长丝状菌体，边缘有透明发亮的棒状菌鞘，即可确定诊断。 也可用革兰染色、镜检，颗粒的中心部菌丝体染色为阳性，分枝状菌丝排列不规则，四周放射状的肥大菌鞘可呈阴性。抗酸染色阴性。3.分离培养 将标本接种在液体培养基在5%CO2的厌氧环境中37℃3～6d，观察生长特点。接种牛心脑浸液琼脂上，观察菌落特征。
二、诺卡菌属 诺卡菌是广泛分布于土壤中的一群需氧性放线菌，多数为腐物寄生性的非病原菌。其中有5～6种诺卡菌可引起人或动物的急性或慢性诺卡菌病，主要为星形诺卡菌和巴西诺卡菌。 （一）生物学特性1.形态与染色 本菌形态基本与放线菌相似，但菌丝末端不膨大。革兰染色阳性，抗酸染色呈弱抗酸性。在培养早期菌裂解为较多的球状或杆状，分枝状菌丝较少。在病人脓、痰、脑脊液中本菌为纤细的分枝状菌丝。2.培养特性 为专性需氧菌，营养要求不高，但繁殖速度慢，一般需5～7d可见到菌落。菌落表面干燥、有皱褶或呈颗粒状，不同种类可产生不同色素。星形诺卡菌可形成黄色或深橙色菌落，表面无白色菌丝。巴西诺卡菌的菌落，表面有白色菌丝。在液体培养基中由于需氧可在表面长成菌膜，下部培养基澄清。
（二）致病性 主要为外源性感染。星形诺卡菌主要通过呼吸道引起肺部感染，产生类似肺结核的症状。也可转移到皮下组织，产生脓肿及多发性瘘管。在病变组织或脓汁可见黄、红、黑等颗粒。而巴西诺卡菌可因外伤侵入皮下组织，引起慢性化脓性肉芽肿组织，表现为脓肿及多发性瘘管，好发于足、腿部，故又称为足分枝菌病。 （三）微生物检验1.标本采集：可采集痰液、支气管冲洗液、组织渗出液、脓液和脑脊液标本。标本采集后，应仔细查找有无黄、红或黑色颗粒，其直径一般小于1mm。本菌在脑脊液、胸腔穿刺液及痰中多不形成颗粒。2.直接镜检：标本中有色素颗粒，用玻片压碎涂片，用革兰染色和抗酸染色检查。镜检有革兰阳性、纤细的菌丝体和长杆菌，抗酸染色弱抗酸性，可初步确定为诺卡菌。
3.分离培养：将标本接种于沙保弱琼脂、脑心浸液琼脂等培养基，置25～37℃需氧环境，培养2～4d后观察菌落特征。如有黄、橙或红色等色素的湿润菌落，挑取菌落按上述生化鉴别特征进行鉴别。 两种常见诺卡菌的鉴别特征
分解
侧金盏花醇
赤藓糖
鼠李糖
半乳糖
枸橼酸盐
葵二酸
50℃8h耐受试验
蛋白质
氨基酸
黄嘌呤
次黄嘌呤
星形诺卡菌
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-
-
-
-
d
D
+
+
巴西诺卡菌
+
+
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+
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-
-
+
+
-
-
放线菌引起的化脓性感染其脓液特征是 A.粘稠，呈金黄色 B.稀薄，呈血水样 C.稀薄，呈蓝绿色 D.稀薄，呈暗黑色 E.可见到硫磺样颗粒
『正确答案』E
下列哪项指标可考虑为放线菌病 A.慢性皮肤感染 B.病灶分泌物可见硫磺样颗粒 C.菌丝末端膨大呈棒状体 D.菌体无抗酸性 E.以上均是
『正确答案』B
下列哪项指标可星形诺卡菌 A.营养要求较高 B.50℃可以生长 C.专性厌氧菌 D.生长迅速 E.以上均是
『正确答案』B
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