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真菌万融实验

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真菌是不分根、茎、叶,不含叶绿素为特征的一大类真核细胞型微生物。真菌种类很多,分布极广,其中有许多与人类日常生活有着密切联系。少数真菌可以感染人体形成真菌病。真菌引起的疾病是多种多样的,以皮肤、毛发和指甲等浅部疾患居多,但近年来,深部致病的真菌也日益重要。

一、真菌基本形态及菌落特点

真菌的形态有单细胞和多细胞两种类型。前者细胞呈圆形或椭圆形,结构较为简单,如新型隐球菌、白色念珠菌等;大多数真菌为后者,多呈丝状,基本结构分为菌丝和孢子。真菌的菌落也与一般细菌不同,掌握真菌的形态结构和菌落特点对菌种的分类鉴定有重要意义。

1.新型隐球菌墨汁负染标本片。

2.白色念珠菌涂片标本。

3.须癣毛菌和石膏样小孢子菌涂片标本。

4.新型隐球菌沙保斜面培养物。

5.白色念珠菌沙保斜面培养物。

6.絮状表皮癣菌沙保斜面培养物。

7.普通光学显微镜、镜油、擦镜纸。

1.取新型隐球菌墨汁负染标本片、白色念珠菌涂片标本片,置显微镜下观察,注意其形态特点。

2.分别观察须癣毛菌及石膏样小孢子菌培养物标本,新型隐球菌、白色念珠菌及絮状表皮癣菌沙保斜面培养物,注意其菌落特点。

1.形态特点新型隐球菌菌体为球形,壁厚,大小不等,菌体周围有宽厚、透明的大荚膜;白色念珠菌菌体呈卵圆形,产生分枝的假菌丝,有厚膜孢子和芽生孢子;须癣毛菌可见小分生孢子群集于分枝菌丝末端,呈葡萄状,亦有圆形小分生孢子位于菌丝的侧旁;石膏样小孢子菌可见梭形具有横隔的大分生孢子。

2.菌落特点新型隐球菌菌落属酵母型菌落,圆形、较大、白色、边缘整齐、表面湿润光滑,与一般细菌菌落相似。白色念珠菌菌落属类酵母样菌落,圆形、较大、白色,菌落底层有假菌丝长入培养基内。絮状表皮癣菌菌落属于丝状菌落,表面有不规则隆起和浅沟,并有白色棉絮样气中菌丝,菌落的基底部呈茶褐色。

二、浅部真菌病临床标本直接镜检方法

浅部真菌病,临床上极为常见。浅部真菌病的病原性真菌属于多细胞真菌,通称皮肤丝状菌或皮肤癣菌,侵犯人体皮肤、毛发和指(趾)甲等而引起癣病。临床上采用的诊断方法很多,主要有直接镜检和分离培养。本实验介绍直接镜检法。

1.发癣或足癣患者的毛发或皮屑。

2.10%~20%NaOH溶液。

3.载玻片、盖玻片、酒精灯、接种环、普通光学显微镜等。

1.将病发或皮屑放于载玻片上,滴加1~2滴10%~20%NaOH溶液。

2.加以盖玻片,在弱火上微微加热,以不沸为度(加速角质溶解,使标本透明)。

3.在盖玻片上轻轻加压,按一下盖玻片,用滤纸吸去周围溢液。

4.先在低倍镜下观察到被检物后,转换高倍镜观察。

镜检时,阳性标本常可看见明显的分枝菌丝或孢子。镜检找到菌丝或孢子时,可确立癣症的诊断;若需确定由何种真菌所致,则有待培养后鉴定。

1.真菌有什么生物学特性?常见的致病性真菌有哪些?




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